د PCR عکس العملونو کې مداخلې

د PCR عکس العمل په جریان کې، ځینې مداخلې عوامل ډیری وختونه ورسره مخ کیږي.
د PCR خورا لوړ حساسیت له امله، ککړتیا د PCR پایلو اغیزه کولو څخه یو له خورا مهم عواملو څخه شمیرل کیږي او غلط مثبتې پایلې رامینځته کوي.
په مساوي توګه مهمې دي مختلف سرچینې دي چې غلط - منفي پایلې لامل کیږي. که چیرې د PCR مرکب یا آفتیک عکس العمل یو یا ډیرو ضروري برخې پخپله مخنیوی یا مداخله وکړي، نو تشخیص کونکی شرکت خنډ کیدی شي. دا کولی شي د اغیزمنتیا او حتی ناسم منفي پایلو لامل شي.
د مخنیوي سربیره، د هدف د اسراییل بشپړتیا له لاسه ورکول ممکن د نمونې چمتو کولو دمخه د بار وړلو او / یا ذخیره کولو شرایطو له امله رامینځته شي. په ځانګړي توګه، لوړه تودوخه یا ناکافي ذخیره کیدی شي د حجرو او نیوکلیک اسیدونو زیان لامل شي. د حجرو او نسجونو فکسینګ او پارافین اختلالات د DNA ټوټې کیدو او یوې دوامداره ستونزې ښه پیژندلي لاملونه دي (د 1 او 2 ارقام وګورئ. پدې قضیو کې، حتی غوره جلا جلا او پاکول به مرسته ونکړي.

شکل 1 | د DNA بشپړتیا باندې د غیر منطقي کولو اغیز
د اګروز ګیل بریښنایی فاسرس موسیریس وښود چې د DNA کیفیت یې د پکسپیس برخو څخه جلا شوی د پام وړ توپیر درلود. د مختلف اوسط څاڅکي اوږدوالی د استخراج میتود پورې اړوند په استخراج کې شتون درلود. DNA یوازې هغه وخت خوندي شوی و کله چې په اصلي منسوب شوي نمونو کې تنظیم شوی او په بفر شوي غیر جانبدار رسمي کې ټاکل شوی. د قوي اسیدیک بوټو اصلاح یا غیر محفل شوي، د فارمیک اسید سره رسمي د DNA د پام وړ زیان په پایله کې پایله درلوده. پاتې برخه خورا پراخه ده.
په کی on اړخ کې، د ټوټې اوږدوالی په کیلو کې جوړ شوي (KBP) کې ښودل شوي

2 شکل | د نیوکیز اسید هدفونو د بشپړتیا له لاسه ورکول
(a) په دواړو برخو کې د 3'-5 'تشه به په نښه شوي DNA کې د وقفې پایله ولري. د DNA ترکیب به لاهم په کوچني ټوټه کې پیښیږي. په هرصورت، که چیرې د لومړني انالیالینګ سایټ د DNA ټوټې کې ورکه وي، یوازې خطي مقصد پیښ کیږي. په خورا خوښه قضیه کې، ټوټې کولی شي یو بل سره واده وکړي، مګر حاصلات به کوچني وي او د کشف له کچې څخه ټیټ وي.
(ب) د اډو له لاسه ورکول، په عمده ډول د تخریب او تیمایډین ډیمیر تشکیل کیدو له امله، د H - بانډونو شمیر او په TM کې د کمیدو لامل کیږي. د اوږدې تودوخې مرحلې په جریان کې، لومړني به د میټریک ډنا څخه لرې شي او حتی د لږ سخت شرایطو څخه به غیر منقول نه کړي.
(c) د بخښنې نخاع د TT ډیمر جوړوي.
بله عمومي ستونزه چې ډیری وختونه په مالي ډول تشخیص کیږي د فینول - کلوروفورم استخراج په پرتله د هدف نیوکلیو اسعزونو غوره خوشې کیږي. په ډیری قضیو کې، دا د غلط منفي سره تړاو لري. ډیر وخت کولی شي د حجرو د لیلیس یا انزایماتیک هضم په واسطه خوندي شي، مګر دا میتود اکثرا د ټیټ کمپیوټر سید سپمید خوشې کیدو له امله د ټیټ کمپیوټر حساسیت له امله راځي.

د نقل په جریان کې د ترهیمس د فعالیت مخنیوی

په عموم کې، مخنیوی د ټول فاکتورونو تشریح کولو لپاره د کانټین م مفهوم په توګه کارول کیږي کوم چې د تصفیه کولو پایلو لامل کیږي. په کلکه بایو کیمیکل معنی کې، مخنیوی د انزایم فعالیت پورې محدود دی، د بیلګې په توګه، دا د DNA پولیمیمری یا د هغې د وړتیا لپاره د فرعي محصول د تبادلې تخفیف کموي (د مثال په توګه، MG2 + د ازموینې DNA پولیمرام لپاره).
په نمونه یا مختلف بفیرز کې اجزاوې او استخراجونه چې په مستقیم ډول انزایم یا د دې کیکټرونو رامینځته کولی شي، چې په دې توګه د ویجاړ شوي یا غلط منفي پیټر پایلو ته غیر فعاله کوي.
په هرصورت، د عکس اخیستنې اجزاو او هدف لرونکي اجزاو نیوکیز اسیدونو ترمینځ ډیری متقابل عملونه هم د PCR مخابرانو په توګه ټاکل شوي. یوځل چې د حجرو صداقت د انزوا لخوا ګډوډ شوی وي او نیوکیسک اسید خوشې کیږي، د نمونې او د هغې شاوخوا محلول ترمینځ متقابل او د جامد پړاو ترمینځ متقرات خپور کیږي. د مثال په توګه، 'سکینجرز' کولی شي د غیر متقابل تعصبونو له لارې یو اړخیزه - یا دوه ګونی ډایینا د هغه اهدافو کمولو سره وتړلو او په پای کې د PCR عکس العمل رګونو رګونو کمولو سره پاک کړي.
په عموم کې، د PCR مخابران د بدن د تشخیصاتو او په وینو کې د کلینیک برخو، غوړ، CA2 + INs) او اجزاو لپاره کارول کیږي)

د PRIV ډیر د عادي رسمي اسیدونو پاکول د استخراجۍ یا وروسته د ګمرکي مخنیوي لپاره غوره میتود دی.
نن ورځ، د اتوماتیک استخراج مختلف تجهیزات کولی شي ډیری لاسي پروتوکولونه ځای په ځای کړي، مګر 100٪ رغونه او / یا د اهدافو پاکول هیڅکله نه دي ترلاسه شوي. احتمالي خیانت کونکي ممکن لاهم د پاک شوي نیوکلیک اسیدونو کې شتون ولري یا دمخه یې اغیزناک کړی وي. مختلف ستراتیژیانې شتون لري ترڅو د لوړوونکو اغیزو کمولو لپاره. د مناسب ترهګري انتخاب کولی شي د انټاپور لیست کې د پام وړ اغیزه ولري. د PRIR مخنیوی کمولو لپاره نور ثابت میتودونه د پولیم غلظت ډیروالي یا اضافه کول لکه امنیتي.
د PCR عکس العمل مخنیوی د داخلي پروسې د کیفیت کنټرول (آی.پی.) کارول (آی.پی.) کارول کیدی شي.
Care must be taken to remove all reagents and other solutions in the extraction kit, such as ethanol, EDTA, CETAB, LiCl, GuSCN, SDS, isopropanol and phenol, from the nucleic acid isolate by a thorough washing step. د دوی غلظت پورې اړه لري، دوی ممکن د PCR فعال یا مخنیوی وکړي.